目的:建立反相HPLC同时测定白花蛇舌草口服液中3,4-二羟基苯甲酸甲酯(Ⅰ)、对香豆酸(Ⅱ)、阿魏酸(Ⅲ)和反式6-O-对香豆酰鸡屎藤苷甲酯(Ⅳ)的含量。方法:采用DiamonsilTMC18柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相A乙腈,B甲醇-水-冰醋酸(5∶95∶0.25),梯度洗脱:0~20 min,1%~16%A;20~42 min,16%A;42~46min,16%~20%A;46~65 min,20%A。检测波长265 nm;流速1.0 mL.min-1。结果:Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ与Ⅳ分别在2.1~105(r=0.9998),3.5~175(r=0.9998),1.72~86(r=0.9999),4.0~200 mg.L-1(r=1.0000)线性关系良好,方法平均回收率分别为99.9%,97.9%,98.6%,98.1%。结论:方法简便快速、准确度高,可用于白花蛇舌草口服液中4种组分的同时测定。