目的:建立一种同时测定白花蛇舌草中咖啡酸、槲皮素和山柰酚含量的方法。方法:应用高效液相法测定咖啡酸、槲皮素和山柰酚的含量,色谱柱为Alltima C18柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相为甲醇(A)-0.5%冰醋酸梯度洗脱(0～15min,30%～60%A;15～30min,60%～60%A);流速为1mL/min;检测波长为350nm;柱温为30℃。结果:测得5个产地白花蛇舌草中咖啡酸、槲皮素和山柰酚的平均量分别在14.218～23.695μg/g、9.919～25.564μg/g和6.229～18.160μg/g;咖啡酸含量测定的线性范围为0.0050～0.2000μg(r=0.9999),平均加样回收率为102.35%,RSD为2.31%(n=6);槲皮素含量测定的线性范围为0.0062～0.2440μg(r=0.9999),平均加样回收率为101.84%,RSD为1.79%(n=6);山柰酚含量测定的线性范围为0.0078～0.3106μg(r=0.9999),平均加样回收率为99.04%,RSD为2.90%(n=6)。结论:本实验中所建立的色谱方法可以简便、准确测定白花蛇舌草中咖啡酸、槲皮素和山柰酚的含量,重现性好。