改良大鼠膀胱平滑肌细胞急性酶分离法及膜片钳应用
改良大鼠膀胱平滑肌细胞急性酶分离法及膜片钳应用
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31 2021-09-10
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正文 简介
目的改良大鼠膀胱平滑肌细胞急性酶分离方法,为利用膜片钳技术研究膀胱疾病提供必要的技术平台。方法采用木瓜蛋白酶和胶原酶Ⅱ,采用一步法和二步法,分别消化5只新生和成年Wistar大鼠膀胱组织,在膜片钳工作台上分别对平滑肌细胞钠钙交换体电流行全细胞记录。结果建立了稳定的新生和成年大鼠膀胱平滑肌细胞急性酶分离方法。新生大鼠钠钙交换体(Na+/Ca2+exchanger,NCX)电流密度(pA/pF)为[(0.21±0.07),n=4],成年大鼠NCX电流密度为[(0.19±0.06),n=6],差异有统计学意义(P<0.05)。KB-R7943在5μm浓度下,有阻滞NCX正向模式的能力。结论本方法改良了大鼠膀胱平滑肌细胞急性酶分离,并成功应用于膜片钳技术检测。
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