目的:建立HPLC法测定骨筋丸胶囊中羟基红花黄色素A、落干酸和龙胆苦苷含量。方法:测定羟基红花黄色素A,采用Eclipse XDB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-水-磷酸(27∶73∶0.05)为流动相,流速1.0 mL·min-1,检测波长403 nm,柱温为室温(20℃);测定落干酸和龙胆苦苷,采用Eclipse XDB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-水(10∶90,醋酸调pH 2.5)为流动相,流速1.0 mL·min-1,检测波长250 nm,柱温35℃。结果:羟基红花黄色素A、落干酸和龙胆苦苷的线性范围分别为0.014~0.288μg(r=0.9995)、0.056~1.120μg(r=0.9998)和0.114~2.284μg(r=0.9997),平均加样回收率(n=9)分别为98.8%、99.8%和99.3%。结论:所建立的方法经方法学验证快速简便,重复性好,专属性强,可作为中药制剂骨筋丸胶囊的质量控制方法。